1.本发明涉及食品加工技术领域,具体涉及一种具有降血糖作用的蜂蜜混合物及其制备方法。
背景技术:2.随着社会进步和经济发展,人们的生活方式发生了很大的改变,糖尿病和高脂血症等代谢性疾病的发病率逐年升高。临床上针对糖尿病的治疗以西药为主,包括注射胰岛素和口服降糖药物,但是这些治疗方法易引起低血糖、肝脏损伤、乳酸中毒以及胃肠道不适等不良反应。因此,积极研发安全、天然、高效的食源降血糖产品已成为干预糖尿病和高脂血症等代谢性疾病的重要举措。
3.翻白草(potentilla discolor bge)又名白头翁,为蔷薇科委陵菜属植物的带根全草,全国各地均有分布,为我国传统中药。现代医学表明,翻白草具有止血、止痢、解毒、降血糖、降血脂的作用,是一种重要的中草药。菊芋(helianthustuberosusl)又称洋生姜、洋姜、鬼子姜,是菊科向日葵属多年宿根性草本植物,高1-3米,有块状的地下块茎及纤维状根。近些年有研究证明菊芋块茎菊粉具有显著的dpp-4抑制活性,能降低血糖和血脂水平,促进胰岛素分泌,缓解糖尿病,临床发现对糖尿病小鼠血糖降低有明显作用。蜂蜜,中成药名。主要成分有80%左右葡萄糖,果糖,还含蔗糖,糊精,有机酸,蛋白质,挥发油,蜡,花粉粒,维生素b1、b2、b7、c、k、h,淀粉酶,转人酶,过氧化酶,酯酶,生长刺激素,乙酰胆碱,烟酸,泛酸,胡萝卜素,无机元素钙、硫、磷、镁、钾、钠、碘等微量元素。具有调补脾胃的功效。主脘腹虚痛;肺燥咳嗽;肠燥便秘;目赤;口疮;溃疡不敛;风疹瘙痒;水火烫伤;手足皲裂。
4.人体实验研究证明,β-葡寡糖具有低热值的特点,可作为膳食纤维在改善肠道微生物菌群、降低血清胆固醇等方面发挥重要功能。β-葡寡糖亦能够激发人和动物体产生细胞因子,介导多种先天免疫和获得性免疫反应,增强机体抵抗力。目前β-葡寡糖已被证明是一种具有多种生物活性的低聚糖,在食品和医药领域具有广泛的应用前景。
技术实现要素:5.发明目的:本发明目的在于针对现有技术的不足,提供一种具有降血糖作用的蜂蜜混合物及其制备方法,集成运用生物大分子技术,有效制备同时具有翻白草,菊芋和β-葡寡糖作用的化合物,并利用蜂蜜高抑菌,高营养的特点混合制成该发明。
6.技术方案:本发明所述一种具有降血糖作用的蜂蜜混合物,包括以下组分:
7.1.5~2.5重量份的翻白草多糖;
8.1.5~2.5重量份的菊芋块茎菊粉;
9.0.5~1.5重量份的β-葡寡糖;
10.4.5~5.5重量份的槐花蜂蜜。
11.进一步地,所述翻白草多糖为1份,所述菊芋块茎菊粉为2份,所述β-葡寡糖为1份,所述槐花蜂蜜为5份。
12.进一步地,本发明还提供一种具有降血糖作用的蜂蜜混合物的制备方法,包括如下步骤:
13.步骤1、运用酶解法提取翻白草多糖;
14.步骤2、制备菊芋块茎菊粉;
15.步骤3、制备高纯度β-葡寡糖;
16.步骤4、将步骤1制得的翻白草多糖、步骤2制得的菊芋块茎菊粉、步骤3制得的β-葡寡糖以及槐花蜂蜜混合,得到蜂蜜混合物。
17.进一步地,步骤1具体的为:
18.1.1、将干燥翻白草粉用蒸馏水浸泡30min-60min,所述干燥翻白草粉与蒸馏水的质量体积比为1:10,浸泡后得到提取液ⅰ;
19.1.2、将提取液ⅰ放置于匀速搅拌机内,在50
±
5℃条件下加入ph为4-6的磷酸盐缓冲溶液,每1h分别加入3000ug
±
150ug纤维素酶和果胶酶,加3次,用于去除提取液ⅰ中的纤维素与果胶成分;处理4h后,灭火得到提取液ii;
20.1.3、在75
±
5℃,功率800w-1000w条件下微波处理提取液ii,再离心,过滤,加入蒸馏水,此刻的微波处理提取液ii与蒸馏水的体积比为1:10;得到提取液iii;
21.1.4、将提取液iii放置于匀速搅拌机内,在50
±
5℃条件下加入ph为4-6的磷酸盐缓冲溶液,每1h分别加入3000ug
±
150ug纤维素酶和果胶酶,用于去除提取液iii中的纤维素与果胶成分同时还加入4000ug-5000ug木聚糖酶;得到提取液iv;
22.1.5、在75
±
5℃,功率800w-1000w条件下微波处理提取液iv,再离心,过滤,加入蒸馏水,此刻的微波处理提取液iv与蒸馏水的体积比为1:10;同时加入2000ml的95%乙醇溶液,并放置2h,得到提取液v;
23.1.6、将提取液v超滤,加碱,ph调至10
±
2碱性条件后经季铵盐沉淀,大孔树脂柱精制后获得纯度84.7%-92.3%翻白草多糖。
24.进一步地,步骤2具体的为:
25.2.1、使用双氧水浸泡菊芋块茎,待脱除表皮色素后,干燥保存;
26.2.2、将干燥的的菊芋原料机械粉碎,在60-90℃环境下搅拌浸提20-80min,过滤无效用的残渣后,将菊芋渣再次浸提10min,物理压滤后得到提取液a;
27.2.3、提取液a中加入石灰乳后,调节ph为11-13,在80-90℃下,静置20min,抽滤除渣;再加入磷酸调节ph为5-7,在80-90℃下,静置20min,得到澄清透明的菊芋块茎菊粉母液;
28.2.4、将澄清透明的菊芋块茎菊粉母液干燥后得到高纯度菊芋块茎菊粉。
29.进一步地,步骤3具体的为:将可德兰多糖放置于微波消解仪中,设置功率为800w-1000w,在160℃-180℃下,静置60min,离心处理后得到高纯度β-葡寡糖。
30.进一步地,步骤4具体的为:
31.4.1、将翻白草多糖和蒸馏水混合,所述翻白草多糖与蒸馏水的质量比1:10~50蒸馏水,50℃恒温摇床振荡器,100-120转/min,60min,得到混合液ⅰ;
32.4.2、高纯度菊芋块茎菊粉混合质量比1:30~65蒸馏水,50℃恒温摇床,180-200转/min,时间为30min,得到混合液ⅱ;
33.4.3、流体状态下每1kg槐花蜂蜜中加入5ugβ-葡寡糖,摇床匀速250-300转/min,时
间为5min,温度为60℃,得到混合液iii;
34.4.4、将等质量的混合液ⅰ与混合液ⅱ混合,温度为60℃,磁力搅拌器转速为800rpm-1000rpm,磁力搅拌器搅拌20min后得到混合液i ii,在其中加入混合液iii,磁力搅拌器转速为1200rpm-1500rpm,磁力搅拌器搅拌30min,所述混合液i ii与混合液iii的质量比为20:1,得到混合液iv;
35.4.5、将混合液iv室温静置30min,得到组合产物。
36.有益效果:与现有技术相比,本发明的优点在于:
37.(1)本发明的混合物中草药活性成分为菊芋块茎菊粉,其原料价格低廉,临床研究成本低;
38.(2)本发明的混合物具有显著dpp-4抑制活性的作用,能促进胰岛素分泌,降低血糖等调节生理功能的作用;
39.(3)本发明的混合物由于生物大分子运用前瞻性,对后续β-葡寡糖商业价值研究有极大可借鉴作用;
40.(4)本发明的混合物由于蜂蜜高渗性、高酸性等天然抑菌作用,具有保存时间长,不易变质,易携带的特点;
41.(5)本发明的操作方法自动化程度高,精度高,安全性强的同时避免了大量的人力投入。
附图说明
42.图1是本发明的制备工艺流程图。
具体实施方式
43.下面通过附图对本发明技术方案进行详细说明,但是本发明的保护范围不局限于所述实施例。
44.实施例1
45.如图1所示的一种具有降血糖作用的蜂蜜混合物的制备方法,包括如下步骤:
46.步骤1、运用酶解法提取翻白草多糖;
47.步骤1具体的为:
48.1.1、将干燥翻白草粉用蒸馏水浸泡45min,所述干燥翻白草粉与蒸馏水的质量体积比为1:10,浸泡后得到提取液ⅰ;
49.1.2、将提取液ⅰ放置于匀速搅拌机内,在50
±
5℃条件下加入ph为6的磷酸盐缓冲溶液,每1h分别加入3000ug纤维素酶和果胶酶,加3次;处理4h后,灭火得到提取液ii;
50.1.3、在75℃,功率1000w条件下微波处理提取液ii,再离心,过滤,加入蒸馏水,此刻的微波处理提取液ii与蒸馏水的体积比为1:10;得到提取液iii;
51.1.4、将提取液iii放置于匀速搅拌机内,在50℃条件下加入ph为6的磷酸盐缓冲溶液,每1h分别加入3000ug纤维素酶和果胶酶,同时还加入4000ug木聚糖酶;得到提取液iv;
52.1.5、在75℃,功率1000w条件下微波处理提取液iv,再离心,过滤,加入蒸馏水,此刻的微波处理提取液iv与蒸馏水的体积比为1:10;同时加入2000ml的95%乙醇溶液,并放置2h,得到提取液v;
53.1.6、将提取液v过截留分子量为10万的中空纤维膜,收集透出液。加10.0mol/l的氢氧化钠缓冲液将ph调至10后液加入质量浓度为5%的十六烷基三甲基溴化铵溶液,使溶液中的十六烷基三甲基溴化铵的浓度达到1.5%,静置,离心,得滤液。向滤液中加入95%乙醇,使溶液中的乙醇浓度达到60%,静置,离心,取沉淀,沉淀用1.0l质量浓度为5%的nacl溶液溶解,再用质量浓度为38%的盐酸溶液调节ph值至5.5,静置,离心,过滤,得滤液0.8l。将滤液上d301型大孔树脂柱床,并用水洗脱至流出液无色透明,得流出液4.5l,浓缩至1.0l,过滤,得滤液0.8l。滤液加入95%乙醇,使溶液中的乙醇浓度达到70%,静置,离心,取沉淀,沉淀用95%的乙醇和丙酮各洗涤两次,真空干燥,获得纯度84.7%-92.3%翻白草多糖。
54.步骤2、制备菊芋块茎菊粉;
55.步骤2具体的为:
56.2.1、使用双氧水浸泡菊芋块茎,待脱除表皮色素后,干燥保存;
57.2.2、将干燥的的菊芋原料机械粉碎,在80℃环境下搅拌浸提60min,过滤无效用的残渣后,将菊芋渣再次浸提10min,物理压滤后得到提取液a;
58.2.3、提取液a中加入石灰乳后,调节ph为12,在85℃下,静置20min,抽滤除渣;再加入磷酸调节ph为6,在90℃下,静置20min,得到澄清透明的菊芋块茎菊粉母液;
59.2.4、将澄清透明的菊芋块茎菊粉母液干燥后得到高纯度菊芋块茎菊粉。
60.步骤3、制备高纯度β-葡寡糖;
61.步骤3具体的为:将可德兰多糖放置于微波消解仪中,设置功率为1000w,在170℃下,静置60min,离心处理后得到高纯度β-葡寡糖。
62.步骤4、将步骤1制得的翻白草多糖、步骤2制得的菊芋块茎菊粉、步骤3制得的β-葡寡糖以及槐花蜂蜜混合,得到蜂蜜混合物。
63.步骤4具体的为:
64.4.1、将翻白草多糖和蒸馏水混合,所述翻白草多糖与蒸馏水的质量体积比1:20蒸馏水,50℃恒温摇床振荡器,100-120转/min,60min,得到混合液ⅰ;
65.4.2、高纯度菊芋块茎菊粉混合质量体积比1:45蒸馏水,50℃恒温摇床,190转/min,时间为30min,得到混合液ⅱ;
66.4.3、流体状态下每1kg槐花蜂蜜中加入5ugβ-葡寡糖,摇床匀速300转/min,时间为5min,温度为60℃,得到混合液iii;
67.4.4、将等质量的混合液ⅰ与混合液ⅱ混合,温度为60℃,磁力搅拌器转速为1000rpm,磁力搅拌器搅拌20min后得到混合液i ii,在其中加入混合液iii,磁力搅拌器转速为1400rpm,磁力搅拌器搅拌30min,所述混合液i ii与混合液iii的质量比为20:1,得到混合液iv;
68.4.5、将混合液iv室温静置30min,得到组合产物。
69.试验例
70.将实施例1制备得到的组合产物进行小鼠动物实验研究,具体如下:
71.wistar大鼠50只,体重在180~200g,验前适应性预饲养1周;将大鼠随机分为5组,每组大鼠数量相同,1组大鼠不建立糖尿病模型,4组大鼠建立糖尿病模型并分为糖尿病模型对照组、实验1组、实验2组和实验3组,糖尿病模型在大鼠腹腔注射1%链脲佐菌素100mg/
kg。五组皆喂养正常饲料,建立糖尿病模型组和糖尿病模型对照组灌胃0.9%的生理盐水,每天1次,连续灌胃6天,实验1组灌胃制备的组合物0.1g,每天1次,连续灌胃6天,实验2组灌胃制备的组合物0.5g,每天1次,连续灌胃6天,实验3组灌胃制备的组合物1.0g,每天1次,连续灌胃6天。4组大鼠在第6天灌胃后进行大鼠空腹血糖(fbg)、血清胰岛素(fins)甘油三酯(tc)、总胆固醇(tg)、高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)和低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)测定。
72.表1
[0073][0074][0075]
表2
[0076][0077]
注:表中数据均为平均数,有一定误差。
[0078]
结果与分析
[0079]
实验3组小鼠实验后体重均显著低于模型对照组,但仍高于正常对照组。
[0080]
与模型对照组相比,各添加组小鼠空腹血糖含量均显著降低,血清胰岛素水平显著升高,口服葡萄糖耐量结果显示本发明混合物能够显著改善小鼠葡萄糖耐量。
[0081]
模型对照组和各添加组小鼠tc含量均高于正常对照组,实验2组,实验3组tg含量显著低于模型对照组,
[0082]
模型对照组和各添加组小鼠hdl-c含量均显著低于正常对照组,hdl-c含量显著高于模型对照组。实验2组和实验3组小鼠ldl-c含量均显著低于模型对照组,实验1组与模型对照组差异不显著
[0083]
由此推测本发明混合物对ii型糖尿病具有显著的改善作用,能够降低空腹血糖含量,提高胰岛素水平,改善口服葡萄糖耐量,说明可能通过增加血清胰岛素水平降低血糖水平,提高葡萄糖耐受力,进而平衡体内糖代谢。还对ii型糖尿病并发的脂代谢紊乱有一定的调节作用,实验2组的即0.5g/200g显著降低血清总胆固醇、总甘油三酯和低密度脂蛋白含量,升高高密度脂蛋白含量。
[0084]
如上所述,尽管参照特定的优选实施例已经表示和表述了本发明,但其不得解释为对本发明自身的限制。在不脱离所附权利要求定义的本发明的精神和范围前提下,可对其在形式上和细节上作出各种变化。