1.本发明涉及生物医药技术领域,具体涉及一种应激性胃炎小鼠模型的构建方法。
背景技术:
2.应激性胃炎一般是指在身体或精神上,遭受重大创伤后出现的胃粘膜应激性病变。严重应激情况下,机体的代偿功能不足以维持胃粘膜微循环的正常运行,造成黏膜血管损伤、糜烂和出血等。由于人体研究需要避免副作用,背景复杂导致的个体差异较大,小鼠模型具有较好的可控性和可操作性,避免研究过程中的诸多混杂因素。
3.目前缺少用于研究应激性胃炎的小鼠模型。常用的胃炎构建方法是通过注射幽门螺旋杆菌使小鼠感染胃炎,如申请号为201910245354.5的中国发明专利公开了一种小鼠慢性萎缩性胃炎模型的制备方法,但是这种方法需要在特定安全级别的实验室进行。也有通过注射特异性抗原使小鼠感染胃炎的方法,但这种方法导致的胃炎与应激性胃炎的诱因不同,发病机制存在差异。
技术实现要素:
4.针对现有技术中的上述不足,本发明的目的在于提供一种应激性胃炎小鼠模型的构建方法,以实现构建可重复性高和稳定的应激性胃炎小鼠模型,进一步应用于相关机制的研究。
5.为了达到上述发明目的,本发明采用的技术方案为:
6.提供一种应激性胃炎小鼠模型的构建方法,该方法包括以下步骤:
7.步骤1、将小鼠在屏障环境中饲养,小鼠适应环境后用于实验;
8.步骤2、气麻小鼠,在小鼠的腹部做一个切口暴露胃部,使用灭菌之后的结扎线结扎小鼠的幽门,让小鼠恢复1小时;
9.步骤3、将长尾夹夹在距离小鼠尾巴尖端0.5cm处15分钟;
10.步骤4、取下长尾夹,将小鼠放置在装有水的长笼盒中45分钟;
11.步骤5、小鼠休息1小时,再次气麻小鼠,将小鼠的贲门结扎;
12.步骤6、取出胃液,检测胃酸分泌量。
13.进一步地,步骤1中,小鼠为8周龄小鼠。
14.进一步地,步骤1中,在实验前24小时,小鼠禁食不禁水。
15.进一步地,步骤2后小鼠始终处于禁水状态。
16.进一步地,步骤4中,长笼盒长33.5cm、宽13.5cm、高12.5cm,其中倒入高度为1cm的水。
17.本发明的有益效果为:
18.1)建立过程简单,易操作。
19.2)构建成本低。
20.3)可重复性和稳定性高。
附图说明
21.图1为本发明应激性胃炎小鼠模型的构建示意图;其中
①‑
夹尾应激;
②‑
触水应激;
22.图2为对照组和应激组小鼠胃酸分泌量检测示意图。
具体实施方式
23.下面对本发明的具体实施方式进行描述,以便于本技术领域的技术人员理解本发明,但应该清楚,本发明不限于具体实施方式的范围,对本技术领域的普通技术人员来讲,只要各种变化在所附的权利要求限定和确定的本发明的精神和范围内,这些变化是显而易见的,一切利用本发明构思的发明创造均在保护之列。
24.实施例
25.步骤1,将购买的8周龄小鼠在学校的屏障环境中饲养一周,小鼠适应环境后用于实验,在实验前24小时,小鼠禁食不禁水;
26.步骤2,使用异氟烷气麻小鼠,在小鼠的腹部做一个切口暴露胃部,使用灭菌之后的结扎线结扎小鼠的幽门,让小鼠恢复1小时,此后小鼠始终处于禁水状态;
27.步骤3,准备长尾夹,计时器,在长33.5cm、宽13.5cm、高12.5cm的长笼盒中倒入高度为1cm的水备用;
28.步骤4,将长尾夹夹在距离小鼠尾巴尖端0.5cm处15分钟;
29.步骤5,取下长尾夹,将小鼠放置在装有水的长笼盒中45分钟;
30.步骤6,小鼠休息1小时;再次气麻小鼠,将小鼠的贲门结扎;
31.步骤7,取出小鼠胃液,使用酸碱微量滴定的方法检测胃酸分泌量。
32.对照组小鼠和实验组小鼠一样,实验前24小时禁食,结扎贲门和幽门,但是在实验组小鼠夹尾和触水应激时,对照组小鼠正常饲养在其笼盒中,不给应激。应激性胃炎会引起胃酸分泌过量,通过检测胃酸分泌量可以确定模型是否建立成功。如图2所示,检测实验应激组和没有应激的对照组小鼠的胃酸分泌量,发现实验组小鼠经过夹尾和触水应激处理之后,胃酸分泌量明显高于对照组小鼠。说明模型构建成功。
33.本发明方法中用到的工具为长尾夹和长笼盒,均为容易获得的工具,易获得易操作。步骤简单,操作难度低,实验人员不需要经过复杂的培训,可重复性高。
34.于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
35.此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
技术特征:
1.一种应激性胃炎小鼠模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、将小鼠在屏障环境中饲养,小鼠适应环境后用于实验;步骤2、气麻小鼠,在小鼠的腹部做一个切口暴露胃部,使用灭菌之后的结扎线结扎小鼠的幽门,让小鼠恢复1小时;步骤3、将长尾夹夹在距离小鼠尾巴尖端0.5cm处15分钟;步骤4、取下长尾夹,将小鼠放置在装有水的长笼盒中45分钟;步骤5、小鼠休息1小时,再次气麻小鼠,将小鼠的贲门结扎;步骤6、取出小鼠胃液,检测胃酸分泌量。2.根据权利要求1所述的应激性胃炎小鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤1中,小鼠为8周龄小鼠。3.根据权利要求2所述的应激性胃炎小鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤1中,在实验前24小时,小鼠禁食不禁水。4.根据权利要求1所述的应激性胃炎小鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤2后小鼠始终处于禁水状态。5.根据权利要求1所述的应激性胃炎小鼠模型的构建方法,其特征在于,步骤4中,长笼盒长33.5cm、宽13.5cm、高12.5cm,其中倒入高度为1cm的水。
技术总结
本发明公开了一种应激性胃炎小鼠模型的构建方法,该方法包括以下步骤:步骤1、将小鼠在屏障环境中饲养,小鼠适应环境后用于实验;步骤2、气麻小鼠,在小鼠的腹部做一个切口暴露胃部,使用灭菌之后的结扎线结扎小鼠的幽门,让小鼠恢复1小时;步骤3、将长尾夹夹在距离小鼠尾巴尖端0.5cm处15分钟;步骤4、取下长尾夹,将小鼠放置在装有水的长笼盒中45分钟;步骤5、小鼠休息1小时,再次气麻小鼠,将小鼠的贲门结扎;步骤6、取出小鼠胃液,检测胃酸分泌量。本发明方法建立过程简单,易操作;构建成本低;可重复性和稳定性高。复性和稳定性高。复性和稳定性高。
技术研发人员:张智 董婉莹 陶文娟 朱霞 唐皓迪 黄继业 程平凯
受保护的技术使用者:中国科学技术大学
技术研发日:2023.08.10
技术公布日:2023/10/15