一种免疫组化质控用蜡块的制作方法-j9九游会真人

1.本发明属于医疗器械技术领域，具体涉及为一种免疫组化用质控器械。


背景技术：

2.临床病理诊断检测中，很多情况下需要对组织尤其是肿瘤组织开展免疫组化处理，以了解组织中特定基因的表达情况，进而为临床诊断及指导临床用药提供参考。
3.为了排除操作误差干扰，有效避免出现假阴性或假阳性结果，临床免疫组化检测过程中会使用已经确诊的阳性及阴性患者组织作为片上质控。但此种方式的质控受患者样本数量及异质性影响较大，不宜作为统一的质控品大量应用于临床。
4.本发明针对现有技术免疫组化结果不容易质控的问题，设置了专利的免疫组化用质控器械。
5.本发明针对现有技术免疫组化质控结果不容易统一的问题，设置了专利的免疫组化质控用蜡块。


技术实现要素：

6.为了克服背景技术中提出的问题，本发明通过将用于质控的不同蛋白表达细胞系固化到蜡块内，形成标准化的产品，以满足统一参照的要求，不会存在因真实病例标本异质性的情况，进而造成的误差或错误的可能；通过将标准统一培养的细胞系制备成细胞柱，并设置到蜡块中，使用时，将蜡块设置到切片机上，制成蜡膜结构，将蜡膜结构固定到载玻片上，并在载玻片上设置病理品反应区，同时对蜡膜及真实的病理检查品进行免疫组化相关处理，通过查看质控片状结构是否准确着色了解处理试剂及处理方法的准确性，当验证准确后，再对比病理品反应区内的病理组织的染色情况了解病理组织内对应蛋白的表达情况。具体及方案如下：
7.一种免疫组化质控用蜡块，包括：
8.质控细胞系柱，设置至少两个质控细胞系柱；
9.阴性细胞系柱，包含有没有表达设定基因蛋白的细胞系；
10.阳性细胞系柱，包含有表达设定基因蛋白的细胞系；
11.蜡块，蜡块上设置有容纳质控细胞系柱的至少两个柱形孔；柱形孔内设置对应的质控细胞系柱；
12.细胞系柱与柱形孔融合方式连接在一起。
13.基座，蜡块设置在基座上，基座与病理切片机适配。
14.通过将标准培养的细胞系制备成细胞系柱，并融合设置到蜡块中，这样制成的质控品进行质控时，质控品是标准统一的，不会因为质控品的不同造成误差；且是通过标准的细胞系培养获得，其可以不断地进行统一标准质控品的制备，进而为获取准确有效的临床数据提供依据。
15.进一步，蜡块设置一个；一个蜡块上设置多个细胞系柱；除阴性对照外，其他细胞
系柱为相同蛋白不同表达情况的细胞系柱；且不同的质控细胞系柱按照从高表达到低表达方式排列，再到不表达的阴性细胞柱。此种方式在进行质控对照后，还可以给出不同表达情况一个参考；方便了解患者病理组织的对应基因的表达情况；以给临床用药一个诊断基础。进一步，还可凌乱顺序进行多个细胞系柱的设置，自行根据表达情况进行分辨。
16.本发明的有益效果：本发明通过对同一种细胞，同一种基因但不同表达情况的细胞系进行培养，并制备成标准的细胞系柱，后包埋在蜡块的柱形孔内；后在切片机上制成标准的多片蜡膜结构，并固定到载玻片上，可以给病理针对的免疫组化一个准确的参考；以确保操作过程及免疫组化试剂的有效性。当存在多个表达梯度的细胞系时；可以有效地给出一个表达区间的参考，对给出用药指导一个更加精准的参考。
附图说明
17.图1为本发明从底部到顶部逐渐缩减的方形凸台样式的蜡块且蜡块内包含两个质控细胞系柱的整体结构示意图；
18.图2为本发明从底部到顶部逐渐缩减的方形凸台样式的蜡块且蜡块内包含4个质控细胞系柱的整体结构示意图；
19.图3为本发明包含4个质控细胞系柱且直线排列的蜡块结构示意图；
20.图4为本发明包含4个质控细胞系柱且弧形排列的蜡块结构示意图；
21.图5为本发明从底部到顶部逐渐缩减的方形凸台样式且包含2个质控细胞系柱的圆形蜡块结构示意图；
22.图6为本发明质控细胞系柱结构示意图；
23.图7为本发明蜡块基座结构示意图；
24.图8为本发明包含两个质控片状结构的载玻片结构示意图；
25.图9为本发明包含两个质控片状结构的载玻片结构示意图；
26.图中，1、质控片状结构；11、阴性质控片状结构；12、阳性质控片状结构；2、蜡膜结构；3、载玻片；4、病理反应区；5、标示区；6、蜡块；7、细胞系柱；8、基座。
具体实施方式
27.以下通过特定的具体实施例对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本发明的其他优点与功效。本发明还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，在不冲突的情况下，以下实施例及实施例中的特征可以相互组合，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
28.实施例1
29.一种免疫组化质控用蜡块，包括：
30.质控细胞系柱，设置至少两个质控细胞系柱；
31.阴性细胞系柱，包含有没有表达需检测基因对应蛋白的细胞系；
32.阳性细胞系柱，包含有表达需检测基因对应蛋白的细胞系；
33.蜡块，蜡块放置到水平面时，蜡块内设置有与蜡块竖直方向一致的质控细胞系柱；
34.更优选的实施方式为：细胞系柱与蜡块融合在一起。此种设置可以保证细胞系柱稳定的设置在蜡块内，其制备时可以先将细胞系柱固定，后灌注蜡液，待蜡液固定后细胞系柱就与蜡块融合在一起。
35.为保证蜡块的有效切割，设置基座，蜡块通过灌注蜡液并以蜡液固定的方式固定设置在基座上，基座与病理切片机适配。此种固定方式可以牢固地将蜡块固定在基座上。
36.需说明，阴性细胞系柱为需检测基因不表达的细胞系柱；其内为需检测基因的不表达细胞系；阳性细胞系柱为需检测基因表达的细胞系柱；通过将标准培养的同一基因不同蛋白表达强度的细胞系制备成细胞系柱，并融合设置到蜡块中，并通过切片机切成带质控细胞系片状结构的蜡膜结构；这样制成的质控品进行质控时，质控品是标准统一的，不会因为质控品的不同造成误差；且是通过标准的细胞系培养获得，其可以不断地进行统一标准质控品的制备，进而为获取准确有效的临床数据提供依据。
37.具体蜡块实施方式为：蜡块设置一个；一个蜡块上设置多个细胞系柱；除阴性对照外，其他细胞系柱为同一基因不同蛋白表达强度的细胞系柱；且不同的质控细胞系柱按照从高表达到低表达再到不表的阴性细胞柱方式排列。此种方式在进行质控对照后，还可以给出不同表达情况一个参考；方便了解患者病理组织的对应需检测基因对应蛋白的表达强度；以给临床用药一个更加精准的诊断基础。
38.更优选的实施方式为：蜡块为一端到另一端尺寸逐渐缩进的凸台结构；此种方式方便将蜡块固定到基座上。
39.更优选的实施方式为：凸台的横截面积为正方形或圆形。凸台还可选择其他的底部形状，不限于上述两种。
40.更优选的实施方式为：在蜡块内的质控细胞系柱的形状及高度相同。此种设置可以保证所有切出来的蜡膜结构都具有统一的细胞系片状结构，且标准统一。
41.更优选地是实施方式为，蜡块的厚度等于细胞系柱的高度，或者蜡块的厚度不低于细胞系柱的高度，但蜡块的上平面与细胞系柱的上平面为同一平面此种设置可以进一步保证切除的蜡膜有效准确；不会因为不统一造成蜡膜上质控细胞系不统一的问题。
42.更优选的实施方式为：设置多个质控细胞系柱；除阴性质控细胞系柱外；其余为不同表达状态的阳性质控细胞系柱。
43.更优选的实施方式，质控细胞系柱设置4个；除阴性质控细胞系柱外，还包括3个不同表达的质控细胞系柱；4个质控细胞系柱根据蛋白表达强度呈梯度设置。通过此种设置可以在确定试剂及操作准确性后，根据不同的表达梯度地对真实病理品的表达情况进行预判。
44.更优选的实施方式，当设置4个质控细胞系柱时，所有质控细胞系柱的中心点在同一直线上，或者所有质控细胞系柱中心点呈弧形设置；弧形设置可以增加不同的质控细胞系柱间的距离，减小设置难度。
45.更优选的实施方式，所有质控细胞系柱设置在蜡块的中间位置。
46.更优选的实施方式，质控细胞系柱为固化的细胞系柱；
47.更优选的实施方式，质控细胞系柱为圆形或方形，其中优选为圆形，所述圆形的直径不超过3mm；其中优选直径不超过2mm。
48.更优选的实施方式，蜡块横截面为方形或圆形膜结构；其中优选，蜡块横截面为正
方形结构；蜡块横截面的直径范围为5—15mm；其中优选8—10mm；正方形的边长范围为5—15mm；其中优选8—10mm；此种设置可以有效稳定是切除的蜡膜的贴附于载玻片上，最终使质控细胞系柱在蜡膜结构上呈点状结构。
49.质控细胞系柱内的细胞系为同一蛋白不同表达状态的人源细胞系；
50.质控细胞系柱内的细胞系为同一蛋白不同表达状态的肿瘤细胞系。
51.如：质控细胞系柱内的细胞系为不同her2表达情况的乳腺癌细胞系。质控细胞系柱内的细胞系为需检测的alk基因，er基因，pr基因，pd-l1基因对应蛋白表达或不表达的细胞系；还可为上述基因对应蛋白不同表达强度的细胞系；质控品为用于检测基因表达情况的质控品。
52.实施例2
53.一种免疫组化用质控器械，其包括：
54.质控细胞系结构，用于免疫组化时提供准确的质控对照；其包括质控片状结构，包含不同对照细胞系的片状结构；至少包括阳性质控片状结构与阴性质控片状结构；阳性质控片状结构为包含阳性对照细胞系的片状结构；阴性质控片状结构为包含阴性对照细胞系的片状结构；
55.需说明，细胞系为培养的基因对应的同一蛋白不同表达强度的细胞系。此种方式可以得到统一有效且标准统一的质控及参考标准，质控及参考标准统一，获得的诊断结果更加准确。
56.蜡膜结构，阳性质控片状结构与阴性质控片状结构设置在蜡膜结构上；阳性质控片状结构与阴性质控片状结构在蜡膜结构上呈现点状；
57.承载结构，包括一个平面，所述平面上设置有带有阳性质控片状结构与阴性质控片状结构的蜡膜结构。
58.更优选的实施方式；承载结构上除所述蜡膜结构外还有病理品反应区。病理反应区与蜡膜结构通过蜡膜结构边缘进行区分。
59.使用时，将病理组织设置到病理品反应区；并对病理组织及蜡膜结构上的阳性质控片状结构与阴性质控片状结构上的细胞系同时进行处理，通过查看质控片状结构是否准确着色了解处理试剂及处理方法的准确性，当验证准确后，再对比病理品反应区内的病理组织的染色情况了解病理组织内对应蛋白的表达情况。需解释说明，阳性质控片状结构内包含的细胞系为需检测基因蛋白表达的细胞系，阴性质控片状结构内包含的细胞系为需检测基因蛋白为表达的细胞系。
60.更优选的实施方式，蜡膜结构设置一个；在一个蜡膜结构上设置所有的质控片状结构；通过在一个蜡膜结构上设置可以减少制备的难度。
61.更优选的实施方式为，质控片状结构大小相同。
62.更优选的实施方式，蜡膜结构上设置至少两个空点，空点内填充质控片状结构。
63.更优选的实施方式为，蜡膜结构与质控片状结构的厚度相同，此种设置可以同切片制备。
64.更优选的实施方式为：设置多个质控片状结构；除阴性与阳性对照质控片状结构外；其余为同一蛋白其他不同蛋白表达强度的细胞系质控片状结构。
65.更优选的实施方式，质控片状结构设置4个；除阴性质控片状结构外，还包括3个不
同表达的阳性质控片状结构；3个阳性质控片状结构随蛋白表达强度从低到高成梯度设置，表达强度最低的阳性质控片状结构靠近阴性质控片状结构。通过此种设置可以在确定试剂及操作准确性后，根据不同的表达梯度对真实病理品的表达情况进行预判。
66.更优选的实施方式，设置4个质控片状结构，所有质控片状结构的中心点在同一直线上，或者所有质控片状结构中心点呈弧形设置；弧形设置可以增加不同的质控片状结构间的距离，减小设置难度。
67.更优选的实施方式，所有质控片状结构设置在蜡膜结构的中间位置。
68.更优选的实施方式，质控片状结构为固化的片状细胞系层；
69.更优选的实施方式，器械还包括标示区，用于标示质控蛋白类型和/或产品名称。标示区还包括二维码区，用于了解产品情况或者为登记患者信息的二维码。
70.更优选的实施方式，蜡膜结构与病理品反应区靠近设置；此种设置方便进行免疫组化操作，且方便对照观察。
71.更优选的实施方式，标示区设置在承载结构第一端位置；蜡膜结构与病理反应区一个设置在中上部，另一个设置在第二端位置。
72.或者，标示区设置在承载结构的第一端位置，蜡膜结构设置在剩余区域的上方位置或下方位置；除标示区及蜡膜结构外，都为病理品反应区。
73.以下为器械中的形状及结构设置的实施方式，具体为：
74.更优选的实施方式，质控片状结构为圆形或方形，其中优选为圆形，所述圆形的直径不超过3mm；
75.更优选的实施方式，蜡膜结构的表面积范围为1-3cm2。
76.更优选的实施方式，蜡膜结构为方形或圆形膜结构；其中优选，蜡膜结构为正方形结构；圆形膜结构的直径范围为5—15mm；其中优选8—10mm；正方形的边长范围为5—15mm；其中优选8—10mm；此种设置可以有效稳定地贴附于载玻片上，最终使质控片状结构在蜡膜结构上呈点状结构。
77.以下为载玻片的具体设置方式：
78.更优选的实施方式，承载结构为载玻片，或其他任意形状玻片；载玻片设置可以减少设置的难度及购买的难度。
79.更优选的实施方式，载玻片为高温高压处理时蜡膜及质控片状结构不易脱模的材料制备；
80.更优选的实施方式，载玻片为正电荷防脱载玻片，或者为适用于全自动染色机的载玻片。此种载玻片的选择可以有效地完成免疫组化检测。
81.以下为质控片状结构内的细胞系的设置方式：
82.质控片状结构内的细胞系为同一蛋白不同蛋白表达强度的人源细胞系；
83.质控片状结构内的细胞系为同一蛋白不同蛋白表达强度的肿瘤细胞系。
84.如：质控片状结构内的细胞系为her2不同表达强度的乳腺癌细胞系。参考图8，其为4质控点的技术方案，其包括不表达的阴性质控片状结构，及三种不同表达强度的阳性质控片状结构。
85.质控片状结构内的细胞系为需检测的alk基因，er基因，pr基因，pd-l1基因对应蛋白表达或不表达的细胞系；还可为上述基因对应蛋白不同表达强度的细胞系。
86.实施例3
87.一种免疫组化用质控载玻片的制备方法：
88.先将不同表达的质控细胞系制成圆柱形细胞系柱；细胞系柱为固化好的细胞系柱；
89.再将需要的细胞系柱设置到同一蜡块中；细胞系柱纵向贯穿设置到蜡块中；制成带有不同表达质控细胞系柱的蜡块。具体为先将细胞系柱固定到指定器皿中，后将融化的蜡液倒入前述指定器皿中，待蜡液的液面与细胞系柱上平面一致后停止，或液面略高于细胞系柱高度，待固化后进行修正；最终达到细胞系柱的上底与蜡块的上底一致。
90.将蜡块设置到切片基座上；
91.放置到切皮机上切片，切成蜡膜结构；蜡膜结构上设置有带有质控细胞系的质控片状结构；
92.蜡块切片后漂浮于水面上；
93.用载玻片承接漂浮的蜡膜结构，最后将蜡膜结构固定到载玻片上，完成制备。
94.实施例4
95.一种免疫组化用质控载玻片的使用方法，将载玻片设置到操作位置，将病理组织设置到病理品反应区；后进行相关蛋白的免疫组化处理并染色；染色后放置到拍照结构内；进行比对，观察质控片状结构的染色情况，了解免疫组化过程的有效性，后比对病理组织的染色情况与质控片状结构的染色情况，了解蛋白的表达情况。
96.上述实施例的说明只是用于理解本发明。应当指出，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进，这些改进也将落入本发明权利要求的保护范围内。